大鼠组织多肽抗原 ELISA北京检测/大鼠TPA ELISA试剂盒说明书-试剂盒-抗体-生物在线
大鼠组织多肽抗原 ELISA北京检测/大鼠TPA ELISA试剂盒说明书

大鼠组织多肽抗原 ELISA北京检测/大鼠TPA ELISA试剂盒说明书

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产品名称: 大鼠组织多肽抗原 ELISA北京检测/大鼠TPA ELISA试剂盒说明书

英文名称: Rat Tissue Polypeptide Antigen,TPA ELISA Kit

产品编号: ELISA实验代测

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产品产地: 加拿大/中国

品牌商标: biofine

更新时间: null

使用范围: 说明书

北京方程生物科技有限公司
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操作步骤
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后立即进行检测。

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室内质控血清的制备:
◎收集阳性血清(无明显溶血、黄胆、脂肪血和污染血清,到一定量(够本室使用3-6个月的量);
◎传染性病毒阳性需经56℃、10小时灭活后使用;
◎过滤,除纤维沉淀物;
◎稀释,用正常人血清或10%小牛血清PBS溶液稀释;
◎测定值,与定值参考品进行对比、求值,一般定在Cut Off值附近的阳性值;
◎分装小瓶(每日用量),加盖、贴签,-20℃冻存备用。
不使用质控血清的室内质控
◎操作过程的质量控制(分析前、后质控)
◎试剂盒阴阳性对照或标准浓度系列。
阴对≤0.05 阳对-阴对>0.8 标准浓度落在2s
阳对 > 0.80 ; 范围内
◎病人资料统计,连续观察病人检测结果的资料,并分析该病人其他化验结果的关系。
质量保证
(Quality Aprovment,QA)
◎质量保证的核心内容是室间质评。室间质评是一种回顾性评价,主要控制试验结果的准确性,也是某些定量试验量值朔源。

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