Ni-NTA-琼脂糖 KIRGEN
产品名称： Ni-NTA-琼脂糖 KIRGEN
英文名称： Ni-NTA-agarose
产品编号： KG8222
产品价格： 0
产品产地： 美国
品牌商标： KIRGEN
更新时间： null
使用范围： null
上海科进医疗器材有限公司
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产品名称： Ni-NTA-琼脂糖 KIRGEN
KG8222 Ni-NTA-琼脂糖 25ml
KG8223 Ni-NTA-琼脂糖 50ml
Ni-NTA蛋白提纯原理：NI-NTA主要用于带His标签蛋白的亲和层析.
① Ni-NTA：琼脂糖或者其他基质共价连接NTA基团,NTA基团与Ni形成四价螯合物,并留下Ni两价用于与其他基团结合.同样作用的还有IDA基团,但NTA相对比较耐还原剂,因此使用较多.
② 组氨酸（His）的R基上带有1个咪唑基团,咪唑基团pKa值在6左右,在pH＞7的条件下,咪唑基团带负电,容易与Ni离子结合.
③ 因此通过Ni-NTA吸附住的蛋白可以使用咪唑、组氨酸、或者其他含N化合物进行竞争洗脱,也可以通过降低pH值使咪唑基团带正电从而洗脱蛋白.
④ NI-NTA上的Ni可以通过EDTA进行螯合竞争洗脱下来.
⑤ 同样的道理,其他过渡金属离子如Cu2+、Co2+等也能起到和Ni一样的作用,但是相比来说,Ni不容易引起蛋白变性.所以Ni柱较为常用.
⑥ 除了组氨酸外,还有一些氨基酸残基如半胱氨酸等也能与金属结合,但结合力比起组氨酸来说较弱.可以通过加入NaCl等消除这种吸附.
Ni-NTA-琼脂糖 KIRGEN产品说明：镍NTA亲和层析介质，是由螯合剂（NTA）共价偶联到Sepharose琼脂糖介质（6%交联度）上，再螯合Ni2+而成。该介质对6×His-tag蛋白具有显著特异吸附能力，采用Sepharose琼脂糖介质比Agarose琼脂糖介质效果更好，颗粒粒度均匀，粒径小，并且螯合镍更稳定，能耐受更高的还原剂，物理和化学稳定性好，批次重复性好。Ni-NTA-琼脂糖 KIRGEN已经螯合好镍离子，可直接用于6×His-tag融合蛋白的纯化。